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冻干型核酸检测试剂——实验操作注意事项及试剂储存条件

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发表时间:2024-10-17 14:51
冻干型核酸检测试剂由于具有可常温储运、操作简便(无需繁琐反应体系配制)、性能稳定等特点,越来越广泛应用于分子生物学实验。接下来,小编对华峰生物冻干型核酸检测试剂(PCR/ RT- PCR荧光探针法)的实验操作注意事项及试剂储存条件做一介绍
一、操作注意事项
1. 实验操作前把所需物品准备齐全;
2. 实验室应严格分区操作,各区物品应专用,不得交叉使用,避免污染;
3. 从密封袋中取出试剂后应及时做好标记,避免检测指标混乱;
4. 冻干试剂使用前应检查试剂状态,试剂受潮萎缩即失效,不应继续使用;若白色颗粒不在管底,可轻甩 PCR 管,将冻干颗粒抖至管底;
5. -20℃的样本 DNA,加样前应室温解冻,做短暂离心后使用;
6. 试剂盒内的阳性对照应视为具有污染性物质,应注意避免污染其他样本和反应试剂;
8. 加样完成后应轻弹管底或涡旋震荡混匀,避免冻干试剂溶解不充分而导致荧光曲线异常;
9.试剂混匀后,应高速离心 30s-1min再上机,避免管内气泡影响荧光曲线判读;
10.检测 RNA 病毒时,应使用无 RNA 酶的耗材;
11. 每次程序运行完后,应等仪器降至室温再打开仪器热盖,避免产物泄露污染实验室;用过的PCR试剂管用保鲜袋或者一次性手套等包裹好,及时带离实验室区域,按规定处理;
12. 做完实验,应及时对各实验区域进行清理,定期消毒或通风处理。
二、试剂储存条件
1.阳性对照复溶后,每次使用完毕,应及时-20℃储存;
2.冻干试剂是用铝箔袋包装的,应避免挤压,以免包装破损或试剂管变形而导致试剂失效或影响使用效果;冻干试剂、复溶液、超纯水等放阴凉处储存,避免阳光直晒;
3.使用八联管时,铝箔袋中的冻干检测试剂可分多次使用,剪取所需数量检测试剂,剩余检测试剂放在铝箔袋最里面,将袋内空气尽量排出,锁好密封条,从开口端将铝箔袋折起,尽量多折几道,最后用燕尾夹将袋子夹好,阴凉处室温避光储存。为防止吸潮,铝箔袋拆封后,请尽快使用完毕。

PCR技术具有重复性好、灵敏度高、快速简便等突出优点,是科研研究最常用的技术之一。但由于其灵敏度高,实验操作人员细微的操作失误就可能导致各种问题,因此,进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度保证结果的准确性。


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