肉源性实时荧光PCR探针法检测

随着经济的发展，人们对肉类的消费需求不断提高，肉类消费市场也不断扩大。由于肉类供应链范围比以前更广泛，加工方式和供应方式的多样化，市场上肉类及肉制品掺假方式也越来越复杂多样，掺假的现象严重影响着侵害了消费者的利益，扰乱了流通市场秩序和健康发展。对于消费者和监管机构而言，对肉类种类进行精准的检测显得格外重要。

传统的检测肉类与肉制品掺假的方法，如感官检验和紫外、液相和气相等色谱技术都存在一定的弊端，如耗时长、样品预处理繁杂、仪器昂贵和对操作人员要求高等。近几年新兴的检测方法，主要是近红外、远红外光谱技术和电子鼻技术，但前者需要建立模型，分析过程复杂，而后者的灵敏度和识别率较低，对检测环境的要求高。

以检测蛋白质为基础的免疫学方法，由于肉类食品中蛋白质的稳定性差、含量变化范围广，干扰因素多等原因，导致了该类方法灵敏度较低、假阳性率较高的现象。基于动物的遗传信息差异建立的实时荧光PCR检测方法，具有特异性强，灵敏度高，可达到0.1%质量比，是肉类掺假鉴定的利器。可以用于检测动物组织及肉类制品中特定动物源性成份的鉴定，具有快速、准确的特点，可进行批量样品的快速检测。

产品介绍

本公司基于动物物种之间遗传信息差异，采用PCR-荧光探针法和冻干技术，开发了动物源性系列检测试剂盒。

检测原理：PCR即聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）是在体外利用聚合酶扩增特异DNA片段的一种方法，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。实时荧光PCR（Real-time PCR)，通过在反应试剂中加入具有荧光特性的荧光探针，利用仪器的光学元件，在PCR反应过程中实时监测荧光值来确定DNA产量。

试剂盒优势：

Ø 应用领域：出入境检验检疫局，食品、药品检验所，疾病、疫病预防控制中心，食品加工厂，养殖场，科研院校，第三方检测机构，进出口贸易企业。

Ø 快速检测：40分钟内完成PCR扩增。

Ø 特异性强：采用TaqMan探针法的qPCR检测试剂，特异性高。

Ø 灵敏度高：可以对极低含量模板进行扩增。

Ø 抗抑制性强：使用经改造的DNA聚合酶，耐抑制性极强。

Ø 使用便捷：采用预混一管式冻干技术，无需试剂配制，室温储存，使用方便。

试剂盒的使用能极大程度地降低了传统PCR技术进行检测的复杂程序，同时降低了对操作人员的技术要求。

使用动物源性检测试剂盒进行检测的流程：

　获取核酸

试剂试剂使用操作

结果分析

从样品提取到检测报告可在1小时内完成。

1.获取检测样品核酸

用相应的核酸提取试剂盒对相应的肉及肉制品进行核酸提取；

也可采用煮沸法，直接剪取少量的样品组织， 100℃加热5min，离心取上清即可

2.动物源性检测试剂使用操作

a 复溶冻干阳性对照

b 复溶冻干检测试剂

c 加样

d 上机反应

3.结果分析

CT值：“S”型扩增曲线与阈值线的交点。

a.      待测样品CT值<30，有FAM荧光信号检出，并出现典型的扩增曲线，则可判断该样品含有相应的动物源性成分。

b.      待测样品CT值>35，则可判断该样品不含有相应的动物源性成分。

c.      待测样品30≤CT值≤35时，则需重复检测，再次扩增后检测体系的CT值≤35，且有典型的扩增曲线，则判定该样品含有相应的动物源性成分。当再次检测的CT值> 35，或无典型的扩增曲线，则判定该样品中不含相应的动物源性成分。

产品目录

目前广州华峰生物科技有限公司开发了驴、狐狸、老鼠、羊、鹅、马、鸡、鸭、猪、牛等10种动物源性检测试剂盒。

公司介绍

广州华峰生物科技有限公司成立于2006年，是一家专注于基因快速检测领域的高新技术企业。公司拥有发明专利29项，是广东省高新技术企业协会理事单位，公司食品致病微生物基因检测试剂盒获广东省优秀品牌。公司是国家出入境检验检疫行业标准《出口食品中致病菌环介导恒温扩增（LAMP）检测方法》的唯一企业参与制定者。  

公司核心产品有食源性致病菌核酸检测系列；聚合酶系列；水产病害微生物核酸检测系列；宠物病原体核酸检测系列；动物源性核酸检测系列等。